诊断甲真菌病要做哪些实验室检查?
甲真菌病的很多表现和一些非真菌感染性甲病类似。仅凭肉眼观察,很难保证诊断的准确性,这时就需要借助真菌学的实验室检查来帮忙,有助于降低误诊率。
甲真菌病的实验室检查方法包括:皮肤镜检查、真菌涂片镜检、真菌培养、病理检查。
皮肤镜检查
皮肤镜又称“皮表透光显微镜”,是皮肤科医生观察皮肤病变的好帮手。
很多人看到“镜”字,就会把它和胃镜、肠镜等联系起来,误认为也需要进入体内观察,检查过程会比较痛苦。但事实并非如此。
皮肤镜是一种无创性的检查,外表看起来和B超等设备差不多,本质上是一种可以放大数十倍的皮肤显微镜。医生能用它来观察肉眼看不见的体表损害,使皮肤或甲的病变表现更清晰,辨别出不同疾病的特征性表现。
真菌涂片镜检
真菌涂片镜检,就是借助显微镜寻找病变甲组织中的真菌成分。
医生会用消毒好的钝刀刮取部分甲碎屑,放在一个玻璃片(医学称为“载玻片”)上,然后滴几滴10%~20% 氢氧化钾溶液,溶解甲的角质细胞。由于真菌的外面还有一层细胞壁,能抵抗氢氧化钾溶液的破坏,因此可以在显微镜下被清晰地观察到。
现在,很多医院在氢氧化钾溶液中添加了荧光染料,可以特异性结合到真菌的细胞壁上,能在荧光显微镜下观察到,让真菌成分显示得更清晰,诊断灵敏度大大提高。
真菌涂片镜检耗时短,从取材到观察,再到出具报告,仅需 10 分钟左右。而且,它的操作简便,应用广泛,对甲真菌病的诊断有重要价值。
甲真菌涂片的镜检报告通常会带一张照片,医生可以在上面看到关节孢子、关节菌丝,或透明菌丝等真菌形态,这些表现都是皮肤癣菌的常见表现。
报告单上也会有文字表述,如阳性或阴性。阳性代表发现真菌成分,即有菌;阴性代表没有发现真菌成分,即无菌。在报告阳性的同时,检验医师还会对真菌的形态进行描述,例如“阳性,关节菌丝”或“阳性,关节孢子”。皮肤科医生会根据描述来推测致病真菌的类别,比如,关节菌丝和关节孢子均提示皮肤癣菌。
真菌培养
这种方法可以在实验室中培养出更多的致病真菌,帮助进一步鉴定菌种。
医生用消毒过的钝刀刮取病变甲的碎屑,然后快速接种到事先准备好的试管或平皿中,其中装有培养基,富含真菌生长繁殖所需的营养物质。
随后,医生将试管或平皿放入28℃的恒温培养箱中,3~4 周后,真菌就能从肉眼看不到的菌丝、孢子,大量繁殖为肉眼可见的菌落。医生可根据菌落的特征和显微镜下的表现,来确定致病真菌的种类。
真菌培养报告会具体写出菌种的名称,如“红色毛癣菌”“趾间毛癣菌”等。只要培养出任何皮肤癣菌,甲真菌感染的诊断即可确立。报告也可能显示“无致病菌”,但由于真菌培养的敏感度和特异度都不是100%,所以这并不能说明“没有甲真菌感染”,还需要结合临床观察和其他检查结果来综合判断。
如果治疗一段时间后效果不佳,您也需要做真菌培养检查,将培养出来的致病真菌进一步拿去做药敏试验,根据最终的结果调整治疗方案。
甲的组织病理学检查
诊断甲真菌病,一般首先考虑真菌镜检与真菌培养结果。但这些检查容易受到标本采集、检验技术、培养条件等多种因素的干扰,会影响检出率。因此,当上述结果与医生的预判不一致,且高度怀疑有真菌感染可能时,就要进一步做甲的组织病理学检查。
和身体其他组织的病理学检查类似,甲的组织病理学检查也是获取一部分甲及甲周组织,然后用石蜡等进行切片制作,在显微镜下观察病变组织的类型。
某些疑难甲病也需要做病理检查。临床上不乏这样的情况:有些甲病按照甲真菌病进行了长期治疗,未获痊愈,然后行病理检查,发现不是甲真菌病。也就是说,甲的组织病理学检查是甲病诊断的“金标准”,对治疗方案的制定很有意义。但它不能取代真菌学检查,只有多种检查相结合,才能准确诊断、精准治疗。
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